ningxueqin 发表于 2024-3-14 16:01:26

羊驼抗体生产公司人ELISA试剂盒操作步骤

  羊驼抗体生产公司人ELISA试剂盒操作步骤
  1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在一、 二孔中分别加标准品100ul,然后在一、二孔中加标准品稀释液50ul,混匀; 然后从一孔、二孔中各取100ul分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50ul,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50ul弃掉,再各取50ul分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50ul分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50u,混匀后从第七、第八孔中分别取50ul加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μ,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为240pg/ml,160pg/ml,80pg/ml,40pg/ml,20pg/ml)。
  2. 加样: 分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40ul,然后再加待测样品10ul(样品zui终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3. 温育: 用封板膜封板后置37°℃温育30分钟。
  4. 配液: 将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
  5. 洗涤: 小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6. 加酶: 每孔加入酶标试剂50ul,空白孔除外。
  7. 温育: 操作同3。
  8. 洗涤: 操作同5。
  9. 显色: 每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50ul,轻轻震荡混匀,37°C避光显色15分钟.以内进行。
  10. 终止: 每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11. 测定: 以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟。

页: [1]
查看完整版本: 羊驼抗体生产公司人ELISA试剂盒操作步骤